Noční provoz v období cca od 0:00 do 4:30 nahrazuje denní linky metra, tramvají a autobusů. Páteří noční dopravy je devět tramvajových linek (91–99) v jednotném intervalu 30 minut (v noci z pátku na sobotu a ze soboty na neděli 20 minut). Všechny noční tramvajové linky na sebe navazují v centrální přestupní zastávce Lazarská a některé linky také ve vybraných ostatních zastávkách.
Noční městské autobusové linky (901–915) jezdí v intervalech 30 (v noci z pátku na sobotu a ze soboty na neděli 20) nebo 60 minut a ve vybraných přestupních bodech navazují na tramvaje nebo na jiné autobusové linky.
V noci se na Letiště Václava Havla Praha dostanete nočním autobusem 910 bez přestupu z centra města. Linka jezdí každých 30 minut. Jízdní doba například ze zastávky I. P. Pavlova je 42 minut.
Na všech nočních linkách platí všechny druhy jednotlivých i předplatních jízdenek.